富马酸伏诺拉生(vonoprazan fumarate,TAK-438,Takeca)是武田制药公司(Takeda)研制的一种钾离子竞争性酸阻滞剂(P-CAB)，片剂于2014年12月首次在日本获批上市，用于治疗幽门螺杆菌感染胃食管反流、消化性溃疡、十二指肠溃疡、食管炎胃溃疡等胃酸相关性疾病。2019年12月在中国上市。

我院于2023年5月接受客户委托进行富马酸伏诺拉生原料药中19种基因毒性杂质（见表1）研究，在不到2个月时间内采用9种分析方法完成了该项目，获得了客户认可与好评。

1.项目难点

（1）杂质种类多，性质不统一，需要分成多个方法进行。

（2）含有多种同分异构体杂质，性质接近，分子量相同，较难分离，易干扰彼此检测。

（3）部分杂质与主成分有类似结构，在质谱中容易裂成相同的碎片，导致待测杂质受主成分的干扰。

（4）部分杂质性质极其活泼，极易与水、醇、酮等发生反应，无法直接测定。

（5）部分杂质出峰与主成分出峰时间接近，切阀后主成分容易进入质谱导致基线升高，待测杂质响应降低、回收率不达标。

2.解决途径及效果

（1）根据各杂质的结构、理化性质如溶解性、沸点等及限度要求选择相应的分析方法，如挥发性的选用气相或气质、不挥发的选用液相、液质，最终用9种分析方法完成了19个杂质的方法开发、验证。方法灵敏度高，检测限最低可做到0.2ng/ml。各杂质线性良好，回收率均在80%~120%范围内。

（2）对于较难分离的同分异构体通过调整流动相组分和比例、改变稀释剂、挑选合适的色谱柱等手段，实现分离并排除干扰。

（3）对于性质活泼的酰氯类杂质通过与醇衍生成酯类化合物，然后与其他酯类杂质一起检测，衍生后的化合物其灵敏度较高，稳定性良好。

（4）对于易受主成分干扰的杂质，通过萃取、溶解后再析出等方式将主成分除去，排除主成分的干扰；或者通过选择特殊的色谱柱、调节流动相的pH、选择不同酸碱度的溶剂等方式将主成分和杂质更好地分离，然后再通过设置切阀时间将主成分切入废液以避免主成分干扰。

我院基因毒性杂质研究中心仪器设备齐全，拥有气质联用仪、液质联用仪、气相色谱仪、液相色谱仪等多种大型分析仪器，人员经验丰富研究项目涵盖亚硝胺、卤代烷、芳胺、硝基苯、醛、酰氯、磺酸酯、苯醌、肼、多环芳烃等全部警示结构基因毒性杂质，为300余家药企、CRO完成了500余个基因毒性杂质研究项目，均顺利通过注册审批，无一发补。

我院制剂研发中心已启动富马酸伏诺拉生片的研发，欢迎业界同仁来我院实地考察，合作共赢！